Fiche plateforme
Coordonnées
Télephone : 03 68 65 41 84
Adresse : Faculté de Pharmacie 74 route du Rhin 67400 ILLKIRCH
Site Internet
Type d'activité
R&D
Domaine d'activité
Imagerie, Biologie cellulaire
Description
L'accent et la spécificité de la plateforme PIQ-QuEST portent sur des approches de microscopie intégrée privilégiant la quantification des phénomènes observés (dynamique, réorganisation intracellulaire, interactions protéine/protéine ou ADN...) avec les dernières approches de microscopie de fluorescence. La plateforme comprend des instruments commerciaux ainsi que des instruments à la pointe de la technologie développés et mis à jour régulièrement grâce à des interactions étroites avec les chercheurs du LBP (UMR 7021) (physiciens, chimistes, et biologistes). Pour quantifier la dynamique et les interactions moléculaires en milieu cellulaire, et ainsi obtenir des informations sur les mécanismes des molécules étudiées, le PIQ offre un large panel d'instruments. Par exemple, pour la microscopie quantitative, l'une des installations basée sur un microscope à deux photons combine l'imagerie par durée de vie de fluorescence (FLIM) et différentes variantes de spectroscopie de corrélation de fluorescence (FCS, 2fFCS, FCCS, RICS). La plateforme est également dotée d'un microscope multimodal 4D (iMIC, Till Photonics), qui permet de suivre des événements rapides, de quantifier des phénomènes de diffusion par FRAP. Le PIQ participe au développement des modules "FRAP one Demand" et "Dynamic FRAP" avec Till Photonics. Pour caractériser les interactions en dessous des limites de diffraction de la lumière, le PIQ a construit deux microscopes à super-résolution PALM/STORM. Le premier est optimisé pour les images super-résolution multicolores en 2D ou 3D avec l'association à l'optique adaptative. La configuration de ce montage permet une résolution de l'ordre de 20 nm en XY et 50 nm en Z. Le second système développé est l'un des premiers systèmes qui combine la microscopie à super-résolution (50 nm de résolution XY) avec la détection spectrale. Avec cette configuration, chaque pixel de l'image reconstruite est associé à l'émission spectrale de fluorescence du fluorophore. Combiné à des colorants fluorogènes, ce montage permet d'identifier la réorganisation du contenu de sous-organelles comme les radeaux membranaires. De plus, comme ces développements sont réalisés directement par les membres de la plateforme de l'UMR 7021, ces instruments peuvent être facilement optimisés pour résoudre une question biologique spécifique ou mis à jour avec les derniers développements technologiques. Ainsi, les microscopes de la plateforme évoluent régulièrement pour répondre rapidement à de nouveaux besoins. Par exemple, deux installations ont été optimisées pour évaluer les nanoparticules à conversion ascendante (UCNP) dans un contexte biologique, en se concentrant sur les mesures de suivi de particules uniques (spt) et d'imagerie de la durée de vie de la phosphorescence (PLIM). Ces développements uniques favorisent les collaborations avec des laboratoires internationaux (Allemagne, Chine) qui évaluent le potentiel de ces sondes nouvellement développées sur leurs propres installations de microscopie. Outre l'accès aux instruments, l'équipe accompagne les groupes de recherche sur les approches les plus pertinentes dans leurs projets, aide à la conception du plan expérimental et participe à l'analyse des données et au développement de traitements spécifiques. Notamment, une équipe du LBP conçoit de nouvelles sondes fluorescentes avec un focus sur les nanoparticules de fluorescence et les sondes fluorogéniques (exemple d'application dans les projets). Ces nouvelles générations de colorants (dont certains sont vendus sous licence (Molecular Probes et Idylle)) qui présentent une luminosité extraordinaire ou une grande sensibilité à leur environnement sont les outils complémentaires parfaits des microscopes à fluorescence avancés pour quantifier des processus biologiques complexes. Il est à noter que PIQ travaille en étroite collaboration avec les industriels par le biais du développement de nouvelles applications de microscopie et de tests de divers modes d'imagerie.
Mots clés
Imagerie de fluorescence quantitative, F-techniques (FLIM/FCS/FRAP), Super résolution PALM/STORM, Développement photonique, Sondes fluorescentes, Biologie cellulaire, Virologie, Trafic membranaire, Cytosquelette, Micro-domaines membranaires, Trafic cellulaire
Secteur
Public
Territoire
Alsace
Membres de la plateforme
Dr RONDE Philippe (Responsable)
Dr RICHERT Ludovic (Contact)
