Exploitation des propriétés anti-tumorales de l'alphagalactosylceramide par ciblage des cellules dendritiques in vivo (NKTCANCER)

Fiche projet

Année

2008

Appel à projets

Projets Libres - Recherches Biomédicales, Recherches en Sciences Humaines et Sociales, Recherche en Epidémiologie et Santé Publique (INCa)

Acronyme

NKTCANCER

Resumé

Le développement de nouvelles stratégies d’immunothérapie anti-tumorale représente un enjeu majeur de santé public. Dans ce contexte, l’activation exogène des lymphocytes T Natural Killer invariants (iNKTs) est une option intéressante. Les iNKTs représentent une population de lymphocytes T non-conventionnels capables de s’activer en réponse à certains antigènes (Ag) lipidiques présentés par la molécule CD1d. En réponse à l’alpha-galacotsylcéramide (a-GalCer), un Ag de très haute affinité pour la molécule CD1d, les iNKTs produisent rapidement de grandes quantités de cytokines capables d’activer de nombreuses populations effectrices, telles les cellules NK et les lymphocytes T CD8+ cytotoxiques. Chez la souris, l’administration concomitante d’a- GalCer et de cellules tumorales protège contre le cancer. Malgré l’enthousiasme initial, les essais cliniques utilisant a-GalCer n’ont pas démontré de bénéfice pour le patient par rapport aux thérapies classiques. Ces résultats décevants pourraient s’expliquer par un ciblage non contrôlé de l’a-GalCer au sein de cellules présentatrices d’Ag (CPAg) différentes, ce qui influencerait la réponse des iNKTs. De façon surprenante, l’utilisation de formulations visant à augmenter les activités adjuvantes de l’a-GalCer n’a pas du tout été explorée. La vectorisation de l’a-GalCer pourrait modifier sa biodisponibilité, sa demi-vie et le ciblage cellulaire, modifiant ainsi la qualité, l’intensité et la durée de la réponse NKTs. Nous postulons également que le ciblage in vivo des cellules dendritiques (DCs), qui représentent les CPAg les plus efficaces, par l’intermédiaire des lectines de type C optimisera la réponse NKT in vivo. Afin d’augmenter les propriétés antitumorales de l’a-GalCer, et d’éviter les contraintes liées au transfert de DCs chez l’homme, nous utiliserons des liposomes et des nanoparticules (NPs) de maltodextrine portant l’a-GalCer, et décorés de molécules mannosylées, pour accéder et conditionner, de façon passive et/ou active, les DCs in vivo. Pour fabriquer les systèmes de délivrance de l’a-GalCer, des glycolipides, composés d’une tête mono-, di- or tétra-mannosylés, seront synthétisés et ancrés dans les liposomes ou les NPs. La signalisation par CD40 jouant un rôle crucial dans les interactions DC/iNKTs et dans l’augmentation des réponses T médiées par les iNKTs, nous combinerons l’a-GalCer et un mimétique synthétique du CD40 ligand afin d’augmenter la réponse. Des constructions variant par leur taille, leur type, et par la présence et le nombre de résidus mannose, seront testées pour leur aptitude à pénétrer dans les DCs et à activer les iNKTs. Des DCs humaines et de souris, différenciées in vitro à partir de progéniteurs ou purifiés ex vivo (souris), seront utilisées. Ce crible initial nous permettra de sélectionner les candidats les plus efficaces pour une étude in vivo au cours de laquelle les constructions/formulations seront injectées chez la souris (i.v.). Le nombre et l’état d’activation des iNKTs ainsi que l’activation des cellules NK et les lymphocytes T CD8+ seront étudiés. En fonction des résultats, notamment si une anergie des iNKTs se développe (comme dans le cas de l’a-GalCer libre), nous co-administrerons de l’IL-2. Différents modèles expérimentaux murins de mélanome (B16F10) et de carcinome pulmonaire (TC-1) seront utilisés afin de tester l’efficacité des constructions/formulations, notamment en thérapie. L’effet de la vectorisation de l’a-GalCer (avec ou sans néo-Ag) dans le développement des tumeurs souscutanées ou des métastases pulmonaires, ainsi que sur la survie des animaux, sera évalué. Le rôle respectif des cellules NK et/ou des lymphocytes T CD8+ dans la protection sera étudié. Notre projet pourrait déboucher sur l’identification d’une nouvelle méthode d’optimisation de la réponse iNKT et d’immunothérapie dans la lutte contre le cancer. Lorsque cette preuve de principe sera validée, des essais cliniques seront envisagés à l’aide d’a-GalCer vectorisé.